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HPLC色譜純?nèi)軇┡c檢測器的匹配和儲存注意事項

更新時間:2018-03-26      點擊次數(shù):3329
HPLC色譜純?nèi)軇?/strong>與檢測器的匹配
在使用紫外可見光檢測器時,需選用無紫外吸收特性的溶劑作流動相。樣品測定波長應(yīng)當在溶劑紫外吸收波長上限以上,噪聲降至10-4~10-U,才能保證檢測的靈敏度,才能用于梯度洗脫。流動相溶劑在整個梯度范圍內(nèi)互溶性要好,盡量減少溶劑折光指數(shù)對溶劑組成梯度的影響。
HPLC色譜純?nèi)軇?/strong>折光指數(shù)的改變會導(dǎo)致紫外吸收度的變化,使紫外檢測器產(chǎn)生噪音和漂移。因此,當使用兩種或兩種以上溶劑做梯度時,其折光指數(shù)應(yīng)該盡量接近,盡量減少溶劑紫外吸收度改變的影響。
在使用示差折光檢測器時,應(yīng)使流動相的折光指數(shù)與被測樣品的折光指數(shù)有盡可能大的差別,因為二者的折射率差別越大,檢測器的響應(yīng)信號越大,檢測靈敏度越高。示差折光檢測器一般不用于梯度洗脫,這是因為隨溶劑組成的改變,流動相的折光指數(shù)也在改變,無法使基線穩(wěn)定。
使用熒光檢測器時,不能使用可熄滅、抑制或吸收熒光的溶劑作流動相。溶劑的極性和溶液的溫度對熒光強度有明顯的影響。增大溶劑的極性,導(dǎo)致熒光增強。通常熒光物質(zhì)溶液的熒光效率和熒光強隨著溫度的升高而降低。此外,當樣品濃度較高時,易引起熒光猝滅效應(yīng)和內(nèi)濾效應(yīng),溶液濃度越大,該效應(yīng)越顯著,溶液中的其它成分,特別是順磁性物質(zhì)的存在,將使猝滅效應(yīng)加劇。因此,在進行熒光檢測時,試樣要配成低于10-6g/mL濃度的溶液,要使用不含熒光物質(zhì)的溶劑。

HPLC色譜純?nèi)軇?/strong>儲存注意事項:
儲存于陰涼、通風(fēng)的庫房。遠離火種、熱源。庫溫不超過30℃,相對濕度不超過85%。保持容器密封。應(yīng)與氧化劑、堿類、活性金屬粉末分開存放,切忌混儲。配備相應(yīng)品種和數(shù)量的消防器材。儲區(qū)應(yīng)備有泄漏應(yīng)急處理設(shè)備和合適的收容材料。
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